實時定量PCR儀通過熒光化學(xué)物質(zhì)(如熒光染料或熒光探針)標(biāo)記DNA產(chǎn)物，在PCR指數(shù)擴增期實時捕獲熒光信號強度變化。系統(tǒng)自動采集每個循環(huán)的熒光增量數(shù)據(jù)，經(jīng)配套軟件進行基線校正和閾值設(shè)定后，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線或ΔΔCt法計算初始模板濃度。這一技術(shù)實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，且整個PCR過程可實現(xiàn)自動化，耗時短，操作方便，不易污染。
 

　　實時定量PCR儀選型建議：

 

　　在選擇實時定量PCR儀時，需綜合考慮以下因素：
 

　　實驗需求：明確待檢測的靶標(biāo)分子類型、檢測靈敏度要求及平臺適用范圍。例如，基因表達分析可選擇4通道系統(tǒng)，而病毒載量檢測則建議選配ROX校正染料通道。
 

　　性能指標(biāo)：關(guān)注溫控系統(tǒng)的精度、靈敏度、擴增速度及均勻性。性能越好的PCR儀，實驗穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性越高。
 

　　品牌和售后服務(wù)：選擇品牌的產(chǎn)品，確保產(chǎn)品質(zhì)量和售后服務(wù)可靠。同時，考慮品牌產(chǎn)品的應(yīng)用范圍和配件選擇。
 

　　預(yù)算：根據(jù)預(yù)算選擇適合的儀器。在預(yù)算有限的情況下，可選擇性能穩(wěn)定、性價比較高的PCR儀。