胃泌素ELISA試劑盒是用于定量檢測血清、血漿等生物樣本中胃泌素含量的科研專用試劑,僅可用于科研實驗,不得用于臨床診斷。
胃泌素ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法,將純化的胃泌素捕獲抗體包被在微孔板上,依次加入樣本、HRP標記的檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經洗滌后加入底物TMB顯色,顏色深淺與樣本中胃泌素含量正相關,通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度,結合標準曲線計算出樣本中胃泌素的實際濃度。
樣本處理要求:
血清樣本:室溫血液自然凝固10-20分鐘,2000-3000轉/分離心20分鐘,收集上清,避免樣本溶血,溶血樣本會直接影響檢測結果。
血漿樣本:選用EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2000-3000轉/分離心20分鐘,收集上清。
樣本采集后盡早提取,若不能立即實驗,可置于-20℃保存,避免反復凍融,不可檢測含NaN3的樣本,其會抑制辣根過氧化物酶活性。
操作與保存注意事項:
試劑盒從冷藏環(huán)境取出后,需在室溫平衡15-30分鐘再使用,未用完的酶標板條需裝入密封袋中干燥保存。
各步加樣需使用校準后的高精度加樣器,一次加樣時間控制在5分鐘內,樣本數量較多時推薦使用排槍加樣,每次測定需同步做標準曲線,建議設置復孔提升結果重復性。
未開封的試劑盒需將標準品、檢測溶液、酶標板置于-20℃保存,使用后的剩余試劑按標簽要求溫度存放,開封后的酶標板需加干燥劑密封保存,避免受潮。